Як вчені ізолюють ДНК для вивчення її?

Як вчені ізолюють ДНК для вивчення її?
Anonim

Відповідь:

Існує кілька кроків для цього, ігноруйте мій поганий англійський, сподіваюся, ви все ще можете зрозуміти процес.

Пояснення:

Це не так складно, як ви думаєте.

Припустимо, що ми хочемо виділити ДНК з вилочкової залози, потрібно дотримуватися цих вказівок (вони є однаковими для яблука, наскільки я знаю, але є невеликі варіації):

  1. Візьміть 3 шматки по 3 грами і наріжте його на дрібні шматочки, наскільки це можливо.

  2. Помістіть його у блендері з 75 мл соляно-натрієвого цитрату (SSC) за штуку і переконайтеся, що лопатка блендера повністю покрита SSC, тому додайте шматочок тимуса, якщо вам це потрібно.

    SSC гарантує, що клітинні мембрани розчиняються.

    Продовжуйте змішувати, поки все не стане гладким.

  3. Помістіть його в пробірку для центрифуги і розмотайте її іншою трубкою, щоб центрифуга не зламалася

  4. Помістіть пробірку в центрифугу протягом 20 хвилин при 5000 об / хв

  5. Коли ви отримуєте трубки з центрифуги, ви повинні побачити два компоненти. Дно має тверду речовину, це називається гранулою, і це містить клітини ядер з ДНК. Ви також побачите рідку речовину, яку називають супернатантом, і вона складається з SSC з розчиненими клітинними мембранами.

  6. Вилийте супернатант одним рухом рідини, це називається декантірованіе, і це залишає вас з гранулою.

  7. Помістіть невелику кількість 2,2 М NaCl у пробірку з таблеткою, щоб гранула була просто покрита NaCl. NaCl викликає осадження білків, що оточують ДНК.

  8. Перемішати його порожньою пробіркою або перемішуючим стрижнем. Зрештою, ви повинні отримати дві складові. Білки на дні і в'язка рідина поверх цього.

  9. Витягніть в'язку рідину за допомогою піпетки і переконайтеся, що не приймаєте білки з в'язкою рідиною. (дуже маленькі шматочки білка дуже важко уникнути, але намагайтеся уникати якомога більше білків)

  10. Помістіть в'язкий флюїд, який ви піпетували, у склянку і додайте в нього вдвічі більше етанолу. Але додайте етанол обережно, тому що ви не хочете змішувати його з ДНК. На межі між етанолом і в'язкою рідиною слід побачити бульбашки ДНК.

  11. Обережно перемішайте скляною паличкою, ДНК заряджена негативно, тому вона повинна прилипати до стрижня.

  12. Помістіть його в пробірку і розчиніть її SSC.

Тоді спеціальна машина може розповісти вам, скільки ДНК ви виділили і наскільки вона чиста.