Чому рестрикційні ферменти зберігаються в 50% розчині гліцерину?

Чому рестрикційні ферменти зберігаються в 50% розчині гліцерину?
Anonim

Відповідь:

Щоб зберегти їх …

Пояснення:

Рестрикційні ферменти використовуються в дуже невеликих кількостях, але зазвичай купуються у трохи більших партіях.

Якщо ні за що інше, ви зазвичай вважаєте за краще робити різні тести з однією партією. Тому придбану партію потрібно зберігати протягом тривалого часу.

Більшість ферментів цілком щасливі у своєму буфері за 4 градуси за Цельсієм деякий час, але зрештою деградують. Зазвичай 24 години є прийнятним обмеженням.

Для тривалого зберігання партія повинна бути заморожена. -20C є стандартним, і буде тримати його протягом декількох місяців. Для навіть більш тривалих періодів (наприклад, один або більше років) -70C є нормою.

Необхідно швидко заморозити його і в невеликих контейнерах (наприклад, Eppendorfs), щоб уникнути занадто частого відтавання / замерзання.

Щоб уникнути пошкодження білка при таких низьких температурах, можна додати стабілізатори, такі як DTT (Di-Thio-Treitol), сироватковий альбумін і, головне, гліцерин (5-50%)

Як не дивно, при температурі -20 ° С необхідно використовувати 50% гліцерину, тоді як у -70 Гліцерин не є необхідним, хоча його доповнення може допомогти стабілізувати білок.