Відповідь:
Багато …
Пояснення:
Є багато причин, чому групи можуть не з'являтися на західному блоті. Чи поєднувалися зразки та антитіла в минулому?
Нижче наведені лише деякі, які я можу припустити на даний момент, що може призвести до того, що смуги не з'являться:
-
Перенесли білок з гелю? Спробуйте пофарбувати мембрану чимось на зразок ponceau S або amido black, щоб побачити, чи присутні смуги. Іноді ви можете бачити білкові смуги на мембрані, змочуючи її і тримаючи її під кутом до світла.
-
Чи працюють первинні антитіла? Це важко перевірити, і єдиний спосіб, яким ви можете, полягає в тому, щоб включити позитивний контроль, де ви знаєте, що у вас є цікавий білок. Якщо у вас є якийсь білок, що цікавить вас, ви можете спробувати помістити його на західну блоттерную мембрану (тобто ви не запустите гель) і побачите, якщо ви отримаєте результат, якщо обробити мембрану, як якщо б вона була західним блотом.
-
Чи розпізнає вторинне антитіло первинне антитіло? Знову ж таки, важко перевірити. Про єдиний тест, який ви можете зробити, це тест на спот, згаданий вище в 2.
-
Чи працює "система виявлення"? Залежно від способу виявлення, який ви використовуєте, ви можете спробувати перейти в деякі з вторинних антитіл, щоб побачити, чи працює розчин виявлення, а також запускає агент / фермент на вторинному антитілі. Тобто, чи можна викликати реакцію тільки з вторинним антитілом?
Нарешті, вона може бути такою ж простою, як одне з рішень, що використовуються під час зондування ділянки, що складається неправильно. Наприклад, якщо концентрація солі є неправильною в буфері, то це може викликати вивільнення антитіл з блоту. Те ж саме відбувається, якщо рН буферів буде неправильним.
"Найдивніша" причина для західного помарки не працювала, що я особисто пережила, коли ми змінили постачальника сухого молока, який ми використовували для блокування мембрани. Порошок з нового постачальника містив фосфотирозин фосфатазу, яка видалила всі групи фосфатів, які ми намагалися виявити за допомогою нашого анти-фосфотирозин антитіла.
Оделл друкує і продає плакати по 20 доларів за кожен. Кожен місяць 1 постер друкується і не може бути проданий. Як ви пишете лінійне рівняння, яке представляє загальну суму, яку Оделл заробляє кожен місяць з урахуванням вартості плаката, який не може бути проданий?
Y = 20x-20 Нехай x - кількість плакатів, які він продає щомісяця. Оскільки кожен плакат становить $ 20, y = 20x ($ 20 * кількість проданих плакатів) Однак ми повинні відняти плакат. Ми знаємо, що 1 плакат - $ 20, тому = 20x-20 (y - загальна сума, яку Одел отримує кожен місяць з урахуванням вартості плаката, який не можна продати)
З 8 чоловіків і 10 жінок має бути сформований комітет, що складається з 6 чоловіків і 5 жінок. Скільки таких комітетів може бути сформовано, коли одна особа А відмовляється бути членом комітету, в якому перебуває дружина його начальника?
1884 в цілому ви можете мати 8 вибрати 6 для чоловіків і 10 вибрав 5 для жінок. Не питайте мене, чому у вас більше жінок, і ваш комітет вимагає менше представництва, але це вже інша історія. Гаразд, отже, що один з цих хлопців відмовляється працювати з однією з цих дівчат. Отже, ця людина не може бути використана з усіма хлопцями, тому ми віднімаємо 1 з 8 і додаємо його комбінації до 7 вибору 1 способу в кінці. Отже, давайте почнемо з іншими хлопцями (7!) / ((7-6)! 6!) = 7 тепер вони можуть бути узгоджені з (10!) / ((10-5)! 5!) = 252 способу для жінки або 7 * 252 = 1764 тепер для останнього хлопця, який відмовився працюват
Прихильники генетично модифікованих продуктів часто стверджують, що ГМО є єдиним способом прогодувати голодний світ. Як це може бути правдою? Як це може бути помилковим?
ГМО мають багато плюсів і мінусів Я знайшов це дивовижне відео на ГМО. Він описує те, що вони насправді є, його переваги та шкоди [http://www.youtube.com/watch?v=7TmcXYp8xu4]