Відповідь:
Дивись нижче
Пояснення:
ПЛР працює на основі матричної ДНК. Давайте скажемо, що ви тестуєте на ВІЛ (ВІЛ - це РНК-вірус, але коли він переходить у клітину, він перетворюється на ДНК… тому в зараженій клітці буде ДНК ВІЛ). Використовувані праймери зроблять продукт (амплікон), який відповідає частині ДНК ВІЛ. Якщо ви бачите цей амплікон, то у вас є присутність послідовності ВІЛ ….. але якщо у вас немає негативного контролю, ви можете мати забруднення.
ПЛР є надзвичайно сенситивною. Є багато рішень, що використовуються в ПЛР (вода, буфер, dNTPs, фермент) … і всі вони можуть легко заразитися ДНК з інших зразків, або навіть з амплікону, який був зроблений в реакції, яку ви зробили вчора. Отже, якщо у вас є зразок ДНК пацієнта Х і ви перевіряєте на наявність ВІЛ за допомогою ПЛР, праймери ПЛР можуть зробити продукт з ДНК ВІЛ у зразку ДНК пацієнта Х (якщо ця особа має ВІЛ), або вона може відмовитися від забруднення. Але ви не можете сказати, що це від забруднення або від ВІЛ в ДНК пацієнтів.
Таким чином, ви запускаєте контроль води. Трубка 1 розміщує всі компоненти реакції, а для ДНК додається тільки вода. Це негативний контроль. НІЧО не слід посилювати тут. У трубі 2 ви поклали всі компоненти реакції і ДНК пацієнта Х. Якщо ви отримаєте продукт тут, (і нічого в трубці 1), пацієнт Х, ймовірно, має ДНК ВІЛ у своїй ДНК. Якщо ви отримуєте продукт як в трубці 1, так і в трубці 2, ви маєте проблему забруднення, і ви не можете сказати, чи є ВІЛ у зразку пацієнта хворобою або від зараження.
Таким чином, ви завжди виконуєте контроль води (вода замість ДНК).
Ми використовуємо тест вертикальної лінії, щоб визначити, чи є щось функцією, то чому ж ми використовуємо тест горизонтальної лінії для зворотної функції, протилежної тесту вертикальної лінії?
Ми використовуємо тест горизонтальної лінії, щоб визначити, чи обернена функція дійсно є функцією. Ось чому: По-перше, ви повинні запитати себе, що таке зворотна функція, це де x і y перемикаються, або функція, яка симетрична початковій функції по лінії, y = x. Отже, так, ми використовуємо тест вертикальної лінії, щоб визначити, чи є щось функцією. Що таке вертикальна лінія? Ну, це рівняння x = деяке число, всі рядки, де x дорівнює деякій константі, є вертикальними лініями. Таким чином, за визначенням зворотної функції, щоб визначити, чи є інверсна функція функцією чи ні, ви пройдете тест горизонтальної лінії, або y = деяк
Чому потрібно проводити ПЛР на ДНК докази з місця злочину?
Він примножує кількість наявної ДНК. Незважаючи на те, що на кожному зразку ДНК, знайденому на місці злочину, не потрібно виконувати полімеразну ланцюгову реакцію (ПЛР), вона часто використовується судово-медичними вченими, оскільки вона посилює ДНК in vitro. Це просто означає, що з крихітних зразків, які можуть бути знайдені на місці злочину, вчені здатні посилити їх і дати більше для роботи в лабораторії, щоб визначити людей, які беруть участь.
Чому ПЛР є надзвичайно цінним інструментом для молекулярного біолога?
Молекулярні біологи зазвичай працюють на ДНК. Зазвичай ізоляція і робота над ДНК - це нудний процес, тому що ДНК занадто мала, щоб бути видимою голими очима. А при виконанні ізоляції ДНК дуже мало може виділятися. І неможливо повторити процес виділення ДНК для досягнення кількості ДНК, на яку можна працювати. Отже, pcr використовується для ампліфікації кількості ДНК шляхом створення кількості його копій, за допомогою яких може бути отримана бажана кількість ДНК, і її можна опрацювати. Таким чином, pcr є одним з основних кроків, що використовуються молекулярними біологами.