Чому важливо, щоб той самий рестрикційний фермент використовувався для розщеплення (розрізання) ДНК обох організмів, що використовуються для створення трансгенного організму?

Чому важливо, щоб той самий рестрикційний фермент використовувався для розщеплення (розрізання) ДНК обох організмів, що використовуються для створення трансгенного організму?
Anonim

Відповідь:

Дивись нижче…

Пояснення:

Рестрикційні ферменти, розрізані на специфічних послідовностях, повинні використовувати такий же рестрикційний фермент, оскільки він продукує фрагменти з однаковими комплементарними липкими кінцями, що робить можливим утворення зв'язків між ними.

Існують певні сумісні сайти обмеження, які можна використовувати разом. Приклади - Xho1 і Sal1. Їх липкі кінці збігаються, і тому вони можуть бути зшиті разом. Але перев'язка вбиває як сайт Xho1, так і сайт Sal1, тому ви не можете скористатися будь-яким із них для повторного вирізання (у місцях перев'язки).

Також можна використовувати екзонуклеазу або ПЛР для отримання найбільш липких кінців (5 або 3 нависання) на тупих ділянках - таким чином, ви можете прив'язати до тупих ділянок - але це, як правило, знищить тупі місця.